Isolasi suatu mikrobia ialah memisahkan mikrobia satu dengan mikrobia lain yang berasal dari campuran berbagai mikrobia.Mengisolasi mikroba dengan cara menumbuhan(menanam) dalam medium padat.Karena dalam medium padat,sel-sel mikroba akan membentuk koloni yang tetap pada tempatnya.Sel mikroba yang tertangkap dalam medium padat berkembang menjadi suatu koloni yang terpisah.Isolasi juga dapat dilakukan menggunakan medium padat yaitu dengan cara pengenceran.
Sedangkan inokulasi bakteri adalah memisahlkan bakteri dari medium lama ke medium baru dengan tingkat ketelitian yang sangat tinggi.Media untuk membiakkan baktri harus steril sebelum digunakan.Pencemaran utama berasal dari udara yang mengandung banyak organisme.Pemindahan biakan mikroba harus dilakukan dengan hati-hati agar tidak terjadi kontaminasi.
Metode isolasi mikrobia ada 3,yaitu:
- Teknik goresan(stereake plate methode): Teknik ini menghasilkan koloni yang terpisah.Kultur bakteri diambil dengan ose,kemudian ose digoreskan pada medium agar.
- Teknik sebaran(spread plate) yaitu teknik menanam dengan menyebarkan suspensi bakteri di permukaan medium agar,agar diperoleh kultur murni.Prosedurnya adalah suspensi bakteri diambil 0,1 ml menggunakan pipet ukur,kemudian diteteskan ke medium agar yang telah memadat.Disekeliling tepi cawan petri dilewatkan ke api secara memutar.Kemudian stapel dicelupkan pada alkohol dan dibakar diatar bunsemn,ditunggu hingga dingin.Kemudian suspensi yang telah diletakkan pada medium disebarkan dengan stapel steril secara merata.Llu dibungkus dan diinkubasi selama 24 jam .
- Teknik taburan(pour plate).Prosedurnya adalah suspensi bakteri diambil sebanyak 1 ml menggunakan pupet ukur,kemudian diteteskan ke dalam cawa petri steril secara aseptis dengan sekeliling tepi cawan petri dilewatkan pada api secara memutar.Kemudian medium NA cair dimasukkan secara perlahan ke dalam cawan petri.Lalu cawan petri diputar membentuk angka 8 agar medium dan supensi bakteri tercampur.Setelah itu dibungkus dan diinkubasi selama 24 jam.